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液相色譜柱的應用及保存

2023-09-19 10:32:28

液相色譜是***種廣泛應用于生物、化學、環境等領域的分離技術,其原理是利用柱填料對混合物進行分離,通過不同成分在柱填料中的分配系數(K值)的差異實現分離。作為液相色譜系統的核心組件,液相色譜柱可直接影響到樣品分離效果和分離速率,是液相色譜分離的關鍵組成部分之***。

 

  色譜柱在使用前,*好進行柱的性能測試,并將結果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是**條件),只有這樣,測得的結果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同。

 

  液相色譜柱的儲存液無特殊說明,均為評價報告所示的流動相。在使用前,***定要注意液相色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中,如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑,應先用10%左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡***下,否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出,堵塞色譜柱。

 

  色譜柱的保存

 

  (1)反相液相色譜柱色譜柱每天實驗后的保養:

 

  使用緩沖液或含鹽的流動相,實驗完成后應用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。注意:不能用純水沖洗柱子,應該在水中加入10%的甲醇,防止將填料沖塌陷。

 

  (2)長期保存色譜柱:

 

  如色譜柱要長時間保存,必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲存于嚴格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲存于水(含防腐劑****或柳硫汞)中,并將購買新色譜柱時附送的堵頭堵上。儲存的溫度*好是室溫。


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