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凝膠滲透色譜的操作流程注意細節

2025-02-11 09:04:51

凝膠滲透色譜是***種基于分子尺寸對聚合物進行分離和分析的技術,其使用流程主要包括以下幾個關鍵步驟:

  1. 前期準備

  - 樣品溶解:選取合適的溶劑將樣品充分溶解。溶劑不僅要能溶解多種聚合物,還不能腐蝕儀器部件,并且要與檢測器相匹配。對于***些難溶的樣品,可以采用加熱、攪拌或超聲等方法輔助溶解。

  - 樣品過濾:溶解后的樣品溶液需要用特定孔徑的濾膜進行過濾,以去除其中的雜質和不溶物,防止它們堵塞色譜柱或影響檢測結果。***般使用0.2μm或0.45μm的濾膜。

  - 儀器預熱:打開凝膠滲透色譜儀的電源,啟動泵系統,讓流動相在系統中循環***段時間,使儀器達到穩定的工作狀態。同時,檢查儀器的各個部件是否正常工作,如檢測器、進樣器等。

  2. 參數設置

  - 流動相選擇與流速設定:根據樣品的性質和色譜柱的要求,選擇合適的流動相。常見的流動相有四氫呋喃、甲苯、二甲基甲酰胺等有機溶劑。然后,設置合適的流動相流速,***般在0.5-1.5ml/min之間。流速過快可能會影響分離效果,流速過慢則會延長分析時間。

  - 柱溫設定:不同的樣品和色譜柱可能需要不同的柱溫。***般來說,溫度越高,分子的運動越快,分離速度也會越快,但同時也會影響分子與固定相之間的相互作用。因此,需要根據具體情況選擇合適的柱溫,通常在20-60℃之間。

  - 檢測器參數設置:根據所使用的檢測器類型,設置相應的參數。例如,對于示差折光檢測器,需要設置靈敏度、衰減等參數;對于紫外檢測器,需要設置檢測波長等參數。

  3. 樣品進樣

  - 手動進樣:如果儀器配備手動進樣器,先將進樣器的注射器吸取***定量的樣品溶液,***般為50-100μl,然后將注射器的針頭插入進樣口,緩慢注入樣品溶液,注意要避免產生氣泡和漏液。

  - 自動進樣:如果儀器配備自動進樣器,按照操作界面的提示,設置進樣的體積、速度等參數,然后將樣品溶液放入自動進樣器的樣品盤中,儀器會自動完成進樣操作。


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